Dr-maksimenko.ru

алгоритм определение группы крови по стандартным сывороткам

Сестра

Определение групп крови стандартными сыворотками

В основе определения групп крови лежит реакция агглютинации, то есть слипания. Комки образуются, если в пробе имеются одновременно агглютиноген А и агглютинин альфа или агглютиноген В и агглютинин бета или же и то, и то одновременно. Агглютиногены содержатся в эритроцитах, а агглютинины являются компонентами плазмы крови.

В соответствие с этими признаками выделяют четыре группы крови по системе АВ0:
— I (0) – не содержит агглютиногенов, только агглютинины;
— II (A) – агглютинин b, агглютиноген А;
— III (B) – агглютинин a, агглютиноген B;
— IV (AB) – содержит только агглютиногены.

Одним из методов установления группы крови является определение групп крови по стандартным сывороткам. Стандартные сыворотки содержат в себе заведомо известные агглютинины: групп I, II и III. Обратите внимание, на фотографию ниже, возможна она будет вам полезна для лучшего восприятия текста.

Протокол процедуры. Алгоритм.
Есть три сектора. Они могут быть в пределах одной тарелки, а могут быть специальными лунками. Секторы подписываются I, II и III, в каждый наносят соответствующую сыворотку.
У пациента выдавливают каплю крови, предварительно протерев палец спиртом. И переносят по капле стеклянной палочки в сектора с сыворотками. Затем перемешивают кровь с сывороткой до розового цвета и засекают время. Реакция проходит в течение пяти минут. Необходимо помнить, что при работе с каждой следующей сывороткой палочка меняется, чтобы не допустить искажения результатов из-за смешения сывороток. По прошествии указанного времени в лунки добавляют изотонический раствор NaCl и перемешивают.

Положительный результат реакции выглядит как красные зёрна, образованные слипшимися эритроцитами, при отрицательном — смесь сохраняет равномерную розовую окраску. Реакция протекает в течение 3-4 минут.


Анализ результатов
Дальнейшее определение групп крови – это элементарная комбинаторика. Если результат в трёх лунках отрицательный, то это группа 0, если прошла реакция только с II и I сыворотками, то группа A, только с I и III – B, а если с обеими – то AB. Все прочие комбинации – являются артефактом и указывают на неверное проведение процедуры анализа.
У ошибок могут быть разные причины. Самые частые это – использование слабых сывороток, у которых закончился срок годности; проведение анализа со слишком большой каплей крови пациента – она должна быть на порядок меньше, чем количество сыворотки, неспецифическая холодовая агглютинация при температуре среды, не соответствующей нормальной и слишком долгое время проведения реакции. Во время подсыхания на периферии смеси образуется зернистость, которая не должна учитываться при оценке группы крови.

Для наглядности, посмотрите это видео.

Определение группы крови и резус-фактора

Определение группы крови и резус-фактора делятся на два способа:

  1. первичное определение группы крови и резус фактора (цоликлоны Анти-А, Анти-B и Анти-D)
  2. вторичная диагностика группы крови и резус-фактора (стандартные сыворотки и перекрестный способ, определение фенотипа, т.е. антигенов C, c, E, e, C w , K, k)

Экспресс-диагностика (первичное определение группы крови и Rh-фактора) не учитывает антигены Келл, не говоря уже про другие системы верификации. Поэтому цоликлоны применяют только для первичного определения группы крови и резус-фактора и при экстренных показаниях трансфузии компонентов крови.

Подробнее о самой редкой группе крови в Мире можно найти здесь.

Определение группы крови и резус-фактора цоликлонами анти-А, анти-В и Анти-D по системе AB0 и системе Резус

Определение группы крови и резус-фактора цоликлонами анти-А , анти-В и Анти-D супер является наиболее современным и относительно простым методом. Для определения группы крови используются цоликлоны, т.е. моноклональные антитела.

Что требуется для определения группы крови и резус-фактора?

цоликлон анти-А ;

цоликлон анти-В ;

цоликлон анти-D ;

– раствор натрия хлорида 0,9 %; специальный планшет; стерильные палочки.

Алгоритм и порядок определения группы крови

Нанести цоликлоны анти-А , анти-В на специальный планшет по одной большой капле (0,1 мл), под соответствующими надписями.

Рядом с ними капнуть исследуемую кровь (0,01–0,03 мл) по одной маленькой капле. Перемешать их и наблюдать за наступлением или отсутствием реакции агглютинации в течение 3 мин. При сомнительном результате добавить 1 каплю 0,9% физиологического раствора.

Расшифровка результатов определения группы крови

  • если реакция агглютинации наступила с анти-А цоликлоном , то исследуемая кровь относится к группе А (II);
  • если реакция агглютинации наступила с анти-B цоликлоном , то исследуемая кровь относится к группе B (III);
  • если реакция агглютинации не наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе 0 (I);
  • если реакция агглютинации наступила с анти-А и с анти-B цоликлонами, то исследуемая кровь относится к группе AB (IV), как показано на рисунке.

Определение резус-фактора цоликлоном Анти- D

На планшете смешивают большую каплю (0,1 мл) анти-D цоликлона и маленькую каплю (0,01 мл) исследуемой крови пациента. За наступлением реакции агглютинации или её отсутствием наблюдают в течение 3 мин.

  • если реакция агглютинации наступила с цоликлоном анти-D , то исследуемая кровь относится к резус-положительной (Rh + )
  • если реакция агглютинации не наступила с цоликлоном анти-D , то исследуемая кровь относится к резус-отрицательной (Rh — )

Другими словами, при смешивании цоликлона Анти-D с резус-положительными эритроцитами наступает реакция агглютинации, а если кровь резус-отрицательная — агглютинация отсутствует (как показано на рисунке — четвертая группа крови резус-отрицательная).

Определение групп крови стандартными сыворотками

Определение групп крови стандартными изогемагглютинирующими сыворотками — поиск и обнаружение в крови антигенов А и В с помощью реакции агглютинации. Для достижения цели используют:

  • Стандартные изогемагглютинирующие сыворотки групп крови О (I) — бесцветная, А (II) — синяя, В (III) — красная, АВ (IV) — жёлтая.
  • Белые тарелки, маркированные группами крови: 0 (I), А (II), В (III), AB (IV).
  • NaCl 0,9%
  • Стеклянные палочки

Методика определение группы крови стандартными сыворотками

Методика определение группы крови стандартными сыворотками

  1. Подписать тарелку (Ф.И.О. пациента);
  2. Нанести обозначения двух серий стандартных сывороток I, II и III групп крови в объёме 0,1 мл, образующие два ряда по три капли слева направо: 0 (I), А (II), В (III);
  3. Забрать кровь из вены. Шесть капель исследуемой крови пациента перенести стеклянной палочкой на пластину в шесть точек рядом с каплей стандартной сыворотки и перемешать.
Читать еще:  анализ крови pct что это и норма у взрослых

Агглютинация начнется через 30 сек. В те капли, где произошла агглютинация, добавить по одной капле NaCl 0,9% и оценить результат.

Оценка результатов определение группы крови стандартными сыворотками

Положительная реакция агглютинации может быть пескообразной или лепестковой. При отрицательной реакции капля остаётся равномерно окрашенной в красный цвет. Результаты реакций в каплях с сыворотками одной и той же группы (двух серий) должны совпадать. Принадлежность исследуемой крови к соответствующей группе определяют по наличию или отсутствию агглютинации при реакции с соответствующими сыворотками после наблюдения в течение 5 мин. При этом следует отметить, что если сыворотки всех трёх групп дали положительную реакцию, это указывает на то, что испытуемая кровь содержит оба агглютиногена (А и В) и принадлежит к группе AB (IV). Однако в таких случаях для исключения неспецифической реакции агглютинации необходимо провести дополнительное контрольное исследование испытуемой крови со стандартной изогемагглютинирующей сывороткой группы AB (IV), не содержащей агглютининов. Лишь отсутствие агглютинации в этой капле при наличии агглютинации в каплях, содержащих стандартные сыворотки групп 0 (I), А (II) и В (III), позволяет считать реакцию специфической и отнести исследуемую кровь к группе АВ (IV).

Определение группы крови перекрёстным способом

Определение группы крови перекрестным способом — обнаружение наличия или отсутствия в исследуемой крови антигенов А и В с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток, а также антител α и β с помощью стандартных эритроцитов. Реакцию со стандартными сыворотками проводят описанным выше способом.

Методика определения группы крови перекрестным способом

Реакция со стандартными эритроцитами

Для реакции со стандартными эритроцитами необходимы стандартные эритроциты трёх групп крови: 0 (I), А (II), B (III).

Методика проведения реакции со стандартными эритроцитами

  1. Кровь для исследования берут из вены в пробирку, центрифугируют или оставляют на 30 мин для получения сыворотки.
  2. На маркированную тарелку наносят три больших капли (0,1 мл) сыворотки крови из пробирки, а рядом с ними по одной маленькой капле (0,01 мл) стандартных эритроцитов групп.
  3. Соответствующие капли смешивают стеклянными палочками, планшет покачивают, наблюдают в течение 5 мин, в капли с агглютинацией добавляют NaCl 0,9% и оценивают результат.

Оценка результатов проведения реакции со стандартными эритроцитами

Оценивают результаты, полученные со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и стандартными эритроцитами. Особенность результатов реакции со стандартными эритроцитами — эритроциты группы 0 (I) считают контрольными. Результат перекрёстного способа считают достоверным, если при реакции со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и со стандартными эритроцитами ответы о группе исследуемой крови совпадают. Если этого не происходит, обе реакции следует переделать.

Как определяют группу крови стандартными сыворотками, методы и особенности проведения

Во многих случаях скорую медицинскую помощь пострадавшему человеку возможно оказать только при знании принадлежности его крови по классификации АВ0. Ведь бывают ситуации, когда кровотечение невозможно остановить оперативно, и переливание – это необходимая манипуляция для реанимации пациента. В экстренных случаях невозможно узнать группу и резус.

Так же важно проводить подобные исследования при планировании и во время вынашивания ребенка для определения трансфузионной совместимости и для выявления риска проявления гемолитической болезни у новорожденного, причиной которой становится несовместимость крови матери и плода по системе AB0. Возможные различия могут привести к иммунным конфликтам в организме матери. Поэтому стоит как можно раньше узнать о наличии или отсутствии теоретически возможного заболевания.

Для этого существуют моментальные тесты, позволяющие определить тип крови.

Методы определения

В условиях современной медицины известно несколько методов, по которым возможно определить принадлежность крови к одной из групп:

  • диагностика с использованием цоликлона, который выступает в качестве индикатора,
  • методика перекрестной реакции,
  • эритротест,
  • метод стандартных сывороток.

Чаще находит место в исследованиях именно последний из перечисленных способов: использование сыворотки для определения группы крови.

Суть метода на основе сыворотки

Сывороточный метод хорош в тех случаях, когда из-за дополнительных сложностей с определением группы крови (например, иммуно-дефицитный, возрастной фактор) требуется довольно широкий спектр тестов. Сыворотка же способна свести множество измерений к одному.

Под группой в гематологии подразумевается набор антигенов, которые, располагаясь на эритроцитах, определяют их особенности.

Антигены представляют собой огромный ряд веществ с разными свойствами и качественными характеристиками, но классифицируют по двум системам:

  • Система AB0. Представляет собой два эритроцитных антигена, объединённых в группы – агглютиногены A и B, плюс два соответствующим им антитела – a (анти-А) и b (анти-B). Их совокупность или же сочетание друг с другом и образует разнообразие известных сегодня групп крови (всего их 4). Отдельно выделяется ряд разновидностей сильных или слабых вариантов одних и тех же антигенов. Например, антиген A1, имеющий концентрацию более 80% или A2, составляющий 20% и так далее. Знание такой теоретической специфики предназначено для предотвращения ошибки в результатах исследования, которая может привести к летальному исходу, так как схема реанимационного лечения будет полностью нарушена, и возможность найти нового донора с соответствующей группой крови не всегда есть.

Строго необходимо переливать кровь, эритроциты и плазму того типа, который отмечен у реципиента, чтобы при переливании не произошла реакция отторжения. В ситуациях особенной экстренности возможно переливание эритроцитов группы 0, у которых отсутствуют групповые агллютиногены.

  • Система резус-фактора. Резус-фактор – это еще один антиген, который обозначается латинской буквой D. Он либо присутствует на эритроцитах (любой группы по АВ0), либо нет. В последнем случае человек считается резус-отрицательным. Есть и другие резус-антигены, но они гораздо менее иммуногенны, не вызывают реакции отторжения и поэтому не учитываются.

Стандартные сыворотки для определения группы крови – это специальные растворы, полученные путем извлечения из донорской крови плазмы с входящими в неё антителами и разведенные добавлением в этот состав изотонического раствора хлорида натрия.

Читать еще:  анализ крови на содержание алкоголя в крови

Методика определения показателей

Алгоритм, который обуславливает определение группы крови и резус-фактора стандартными сыворотками, сводится к ряду манипуляций.

Изготовление сыворотки

Самый логичный и общепринятый шаг в процедуре изготовления сыворотки – это отмывание заранее полученной от донора крови для предотвращения попадания в организм реципиента инородных веществ, которые в дальнейшем могут вызвать реакцию, которая послужит причиной для неверного трактования результатов. Далее, путем центрифугирования, плазма крови в очищенном состоянии готова к использованию в изготовлении сыворотки.

Далее идёт ее разведение. В пробирку, которая должна содержать 1 мл 90% пищевой соли, постепенно добавляется 1 мл плазмы крови. После чего полученный раствор тщательно перемешивается.

Из полученного ранее раствора пипеткой отделяют 1 мл плазмы, после чего он добавляется во вторую емкость, наполненную изотоническим раствором. Необходимо соблюдать строгое соотношение плазмы, равное 1:256. В противном же случае состав крови при последующих исследованиях может быть определён неверно.

Логично отметить, что сыворотки, предназначенные для определения группы крови, разные по составу. Всего для единичного исследования используют три стандартные сыворотки двух серий для каждой группы, различные по цвету:

  • I(0) – не имеет окраски,
  • II(А) – голубая и III(B) – розоватая.

На одно исследование приходится две сыворотки одного типа: одна считается контрольной, другая же, собственно, служит для самого исследования.

Проведение исследования

Определение группы крови сыворотками проводится строго при температуре 15-25 градусов по Цельсию. Помещение, в котором проводится данное клиническое исследование, должно быть хорошо освещено и быть предназначено именно для таких тестов. Для его проведения потребуется приготовить следующие приспособления и инструменты для измерений:

  • продезинфицированную заранее посуду белого цвета,
  • гигроскопическую вату,
  • карандаш, которым нужно в дальнейшем поделить тарелку на сектора,
  • набор из специальных стеклышек и палочек,
  • три пипетки,
  • непосредственно стандартные сыворотки, представленные 0(I), А(II) и В(III) гр. крови,
  • изотонический раствор хлорида натрия, йод и муравьиный спирт для обработки.

Исследования для каждой группы проводится отдельной пипеткой для исключения возможных диагностических ошибок.

Как описано ранее, определение группы крови и резус-фактора стандартными сыворотками основывается на реакциях, происходящих с эритроцитами в период проведения исследования. Поэтому очень важно следить за состоянием оборудования и инструментов для теста, категорически избегая попадания на них влаги, которая разрушает структуру кровяных клеток.

Процесс исследования:

  • На тарелку, предварительно разделенную на три участка (сектора) карандашом, размещают при помощи пипетки три образца сыворотки разных видов. И помечают рядом с каждой каплей наименование раствора, соответствующего типу крови.
  • После того как капля сыворотки размещена на помеченном для неё секторе, пипетку необходимо тут же вернуть в ту же ёмкость, в которой она была ранее.
  • Далее идёт обработка пальца перед взятием крови, которая заключается в простом дезинфицировании участка кожи медицинским спиртом. Затем выполняют забор крови посредством укола в мякоть пальца.
  • Полученная алая жидкость собирается предметным стеклом или палочкой в количестве трёх капель, которые не должны превышать по размеру величину головки простой швейной булавки. Отобранные капли аккуратно перемещаются на тарелку с остатками сывороток. После данной манипуляции начинают подсчет времени при помощи часов.
  • Кровь аккуратно перемешивается с сывороточным раствором в строгих пределах каждого сектора при помощи специальных для каждого отдела стеклянных палочек. Палочки после единичного действия должны сменяться на новые. Проводить повторяющуюся манипуляцию надо до тех пор, пока образующиеся консистенции не приобретут однородный розовый оттенок.
  • По истечению пяти минут (время контролируется по часам), когда растворы находятся в состоянии протекании реакции, к ним добавляется изотонический хлорид натрия в количестве одной капли на каждый из секторов. Затем тарелку слегка раскачивают, чтобы образцы крови перемешались с добавленным в него составом, но не слишком сильно, чтобы образцы не смешались между собой.

Этот шаг завершающий – далее же можно наблюдать результаты анализа с использованием сыворотки для определения группы крови.

Подробнее о том, как происходит определение типа крови, рассказывается в представленном ниже ролике:

Результаты исследования

При положительном результате в течение нескольких первых минут, ещё до добавления изотонического раствора, происходит склеивание эритроцитов, которое проявляется в возникновении красных сгустков в реагирующем растворе. В дальнейшем эти зернышки могут, сливаясь друг с другом, образовывать красные «островки». Если же говорить научным языком, это гемагглютинация – процесс склеивания между собой с дальнейшим выпадением в осадок эритроцитов крови.

Если же после проведённых манипуляций розовый цвет раствора остался неизменным, то реакция, что логично, является отрицательной.

Существует ряд закономерностей, которые зависят от комбинаций положительных и отрицательных реакций в сыворотках:

  • В случае если положительной реакции нет ни в одном из исследуемых секторов, то это означает, что реципиент имеет кровь группы 0(I).
  • Если неизменной осталось состояние сыворотки А(I), а две остальные дали положительную реакцию, это значит, что кровь исследуемого имеет А(II) группу.
  • В случае отрицательной реакции только на В(III) из всех трёх говорят, что реципиент имеет ту группу крови, на которую не «пошла», то есть В(III).
  • Если же красные зернышки образовались в каждой из трёх жидкостей, то такая кровь относится к AB(IV) группе.

Для удобства запоминания используется либо схема, либо таблица. Возникновение иных комбинаций относят к ошибочным, получившимся из-за погрешностей при проведении исследования.

Существует ряд таких погрешностей:

  • Неверная концентрация крови, используемой для измерения. Обычно к ложным результатам приводит превышение заданной нормы для добавления к сыворотке.
  • Несвежесть взятых образцов сыворотки или их неправильное хранение приводит к малоактивным реакциям с эритроцитами.
  • Низкие температуры могут привести к панагглютинации, которая, как правило, тоже проходит очень слабо.
  • Неточность временных рамок может привести к подсыханию поверхности сыворотки. То есть результат исследования становится почти не заметен.
Читать еще:  анализ крови на гормоны женские когда сдают

Метод проведения исследования на предмет группы крови с использованием стандартных сывороток – самый распространённый среди мгновенных исследований в условиях экстренной необходимости. Это делает его наиболее значимым и уникальным в условиях современной медицины.

Несколько стандартных способов определения группы и резуса крови, используемых в частных и муниципальных лабораториях:

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУППЫ КРОВИ ПРИ ПОМОЩИ СТАНДАРТНЫХ СЫВОРОТОК И ЦОЛИКЛОНОВ

Техника выполнения:

1. Возьмите чистую маркированную тарелку или планшет. Если тарелка не маркирована, карандашом «стеклограф» проведите две пересекающиеся линии, делящие тарелку на четыре части.

2. Карандашом «стеклограф» на тарелке обозначьте группу крови слева направо: O (I); A (II); B (III); AB (IV).

3. Под соответствующим обозначением на тарелку нанесите по 2 капли стандартной изогемагглютинирующей сыворотки I, II, III групп двух различных серий.

4. Наденьте перчатки. Обработайте кожу подушечки пальца (ногтевой фаланги) пациента антисептиком и проколите ее копьем скарификатора. Выдавите кровь и заберите пипеткой или краем предметного стекла.

5. Нанесите каплю крови рядом с каплей сыворотки и легким покачиванием тарелки (планшета) или стеклянной палочкой с закругленным концом смешайте испытуемую кровь со стандартными гемагглютинирующими сыворотками в соотношении 1:10.

6. Тарелку (планшет) слегка покачивайте, затем оставьте под наблюдением. Через 3 мин в капле смеси сыворотки с эритроцитами, в которых наступила агглютинация, добавьте по одной капле изотонического раствора хлорида натрия и, слегка покачивая, смешайте.

7. По истечении 5 мин оцените результат исследования и дайте заключение о групповой принадлежности исследуемой крови.

Рис.59. Оценка результатов реакции агглютинации со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками

При отсутствии агглютинации во всех трех группах исследуемая кровь соответствует группе Oab (I).

При отсутствии аггютинации с гемагглютинирующей сывороткой второй группы крови исследуемая кровь принадлежит ко второй группе Ab (II).

При отсутствии агглютинации с сывороткой третьей группы крови исследуемая кровь принадлежит к третьей группе Ba (III).

При наличии агглютинации во всех трех группах продолжите исследование со стандартной сывороткой группы AB (IV),в которой агглютинации не должно быть; тогда исследуемая кровь принадлежит к четвертой группе AB (IV).

Определение группы крови

С помощью цоликлонов анти-А и анти-В

Техника выполнения:

1. Тарелку разделите стеклографом на две части, каждую из которых маркируйте буквами АиВ.

2. В каждую часть тарелки нанесите по две больших капли (0,1 мл) цоликлона (анти-А и анти-В, соответственно маркировке частей тарелки).

3. Рядом с каплями цоликлонов поместите каплю исследуемой крови в 10 раз меньше капли цоликлона (0,02-0,03 мл).

4. Стеклянной палочкой или уголком предметного стекла смешайте каплю крови с каплей цоликлона.

Рис.60. Определение группы крови с помощью цоликлонов

5. Оцените результаты исследования через 3 мин. Хотя четкая агглютинация с цоликлонами обычно наступает в первые 30 сек., возможно и более позднее наступление агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В.

При отсутствии агглютинации с обоими цоликлонами – это группа крови Oab (I).

При наличии агглютинации с анти-А-цоликлоном – группа крови Ab (II).

При наличии агглютинации с анти-В-цоликлоном – группа крови Ba (III).

Наличие агглютинации с обоими цоликлонами свидетельствует о том, что необходимо исключить неспецифическую агглютинацию исследуемых эритроцитов. Проведите контрольное исследование данной крови с изотоническим раствором хлорида натрия; отсутствие агглютинации с этим раствором подтверждает, что исследуемая кровь группы AB (IV).

ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗУС – ФАКТОРА.

СИСТЕМА АНТИГЕНОВ

СИСТЕМА АНТИГЕНОВ Rh

Практическое значение при переливании крови имеют шесть антигенов системы Rh: три разновидностиRh-антигена – Rh o (D), rh ’ (C), rh”(E).Антигены этой системы имеются в эритроцитах, тромбоцитах, лейкоцитах и жидкостях организма. Наиболее антигенными свойствами обладает антиген D(Rh o ).

Среди европейцев 85% населения являются носителями резус-антигена, т.е. резус-положительными, а 15% не имеют резус-антигена, т.е. резус-отрицательными.

Резус-отрицательными донорами считаются лица, в эритроцитах которых не содержится ни один из антигенов Rh o (D), rh ’ (C) и r”(E). Резус-положительными считаются лица, у которых в эритроцитах обнаруживается антигенRh o (D), rh ’ (C )илиrh”(E).Лица, в эритроцитах которых имеются антигеныrh ’ (C)иrh”(E), будучи донорами, относятся к резус-положительным, но будучи реципиентами, считаются резус-отрицательными, так как не имеют антигена Rh o (D), который легко определяется в условиях стационара в связи с наличием универсальной антирезусной сывороткиRh o (D).

Женщины с резус-отрицательной кровью могут быть иммунизированы резус-положительным плодом.

МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РЕЗУС-ФАКТОРА Rh о (D)

Rh o (D)-фактор определяется с помощью универсального стандартного реагента в пробирке без подогрева.

Рис.61. Определение резус-фактора универсальным реагентом антирезус анти-Rh(D) в пробирке без подогрева

Оснащение:

1. Пробирки – 3 шт.

2.Стандартный универсальный реагент антирезус анти-Rh o (D).

3. Физиологический раствор хлорида натрия.

4. 33% раствор полиглюкина.

5. Исследуемая кровь.

Техника выполнения:

1. Наденьте перчатки.

2. Возьмите стандартную универсальную сыворотку антирезус анти-Rh o (D) введите в две пробирки по 2 большие капли (0,1 мл), в третью пробирку (контрольную) введите 2 капли (0,1 мл) изотонического раствора хлорида натрия и 1 каплю (0,05 мл) 33% раствора полиглюкина.

3. Во все пробирки введите по 1 небольшой капле (0,05 мл) исследуемой крови.

4. Содержимое пробирок перемешайте, вращая пробирки почти до горизонтального положения несколько раз.

5. Через 3 мин в пробирки с реагентом и кровью добавьте по 2-3 мл изотонического раствора хлорида натрия и перемешайте содержимое двух-трехкратным вращением пробирок (не встряхивать!).

6. При наличии агглютинации в виде крупных хлопьев (агглютинатов) из склеенных эритроцитов на фоне просветленной жидкости исследуемую кровь нужно считать резус-положительной.

7. При отсутствии агглютинации (в пробирке сохраняется розовое окрашивание, гомогенное, без хлопьев), исследуемая кровь является резус-отрицательной.

8. В контрольной пробирке агглютинации не должно быть, так как не содержит антител антирезус.

МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РЕЗУС-ПРИНАДЛЕЖНОСТИ

Последнее изменение этой страницы: 2016-04-18; Нарушение авторского права страницы

Ссылка на основную публикацию
Adblock
detector